大部分高等植物和藻類微生物的葉綠體內類囊體緊密堆積。主要含有葉綠素(a和b)、胡蘿卜素和葉黃素,葉綠素a和葉綠素b主要吸收藍紫光和紅光,胡蘿卜素和葉黃素主要吸收藍紫光。這些色素吸收的光都可用于光合作用。葉綠素的含量最多,遮蔽了其他顏色,而且,葉綠素吸收綠光最少,綠光被反射,所以呈現綠色。主要功能是進行光合作用。葉綠體(chloroplast)存在于藻類和綠色植物中的色素體之一,光合作用的生化過程在其中進行。因為葉綠體除含黃色的胡蘿卜素外,還含有大量的葉綠素,所以看上去是綠色的。褐藻和紅藻的葉綠體除含葉綠素外還含有藻黃素和藻紅蛋白,看上去是褐色或紅色[有人分別稱為褐色體(phacaplost)、紅色體 (rhodoplast)]。許多植物的葉綠體是直徑5微米左右,厚2—3微米的凸透鏡形狀,但低等植物中則含有板狀、網眼狀、螺旋形、星形、杯形等非常大的葉綠體。葉肉細胞中含的葉綠體數通常是數十到數百個。已知有的一個細胞含有數千個以上葉綠體的例子,以及僅有一個葉綠體的例子。用光學顯微鏡觀察葉綠體,它的平面相多數為0。5微米大小的濃綠色粒狀結構(基粒)。基粒的清晰程度和數量隨植物和組織的種類及葉綠體的發(fā)育時期而不同,反映著內膜系統(tǒng)的分化程度。包著葉綠體的包膜由內外兩層膜組成,對各種各樣的離子以及種種物質具有選擇透過性。在葉綠體內部有基質、富含脂質和質體醌的質體顆粒,以及結構精細的內膜系統(tǒng)(片層構造,類囊體)。在基質中水占葉綠體重量的60%—80%,這里有各種各樣的離子、低分子有機化合物、酶、蛋白質、核糖體、RNA、DNA等。在綠藻、褐藻,紅藻、接合藻、硅藻等許多藻類的葉綠體中存在著淀粉核。構成內膜系統(tǒng)微細結構基礎的是類囊體。在具有基粒的葉綠體中重疊起類囊體或復雜地折疊起來,分化成所謂的基粒堆(grana stack)和與之相聯系的膜系統(tǒng)[基粒間片層(intergrana lamellae)。各種光合色素和光合成電子傳遞成分、磷酸化偶聯因子等存在于類囊體中,色素被光能激發(fā)、電子傳遞、直到ATP合成都在類囊體上及其表面附近進行。利用由此生成的NADPH和ATP在基質中進行二氧化碳固定。
幾乎可以說一切生命活動所需的能量來源于太陽能(光能)。綠色植物是主要的能量轉換者是因為它們均含有葉綠體(Chloroplast)這一完成能量轉換的細胞器,它能利用光能同化二氧化碳和水,合成貯藏能量的有機物,同時產生氧。所以綠色植物的光合作用是地球上有機體生存、繁殖和發(fā)展的根本源泉。
古生物學家推斷,葉綠體可能起源于古代藍藻。某些古代真核生物靠吞噬其他生物維生,它們吞下的某些藍藻沒有被消化,反而依靠吞噬者的生活廢物制造營養(yǎng)物質。在長期共生過程中,古代藍藻形成葉綠體,植物也由此產生。
高等植物的葉綠體存在于細胞質基質中。葉綠體一般是綠色的扁平的快速流動的橢球形或球形,可以用高倍光學顯微鏡觀察它的形態(tài)和分布。
在高等植物中葉綠體象雙凸或平凸透鏡,長徑5~10um,短徑2~4um,厚2~3um。高等植物的葉肉細胞一般含50~200個葉綠體,可占細胞質的40%,葉綠體的數目因物種細胞類型,生態(tài)環(huán)境,生理狀態(tài)而有所不同。在藻類中葉綠體形狀多樣,有網狀、帶狀、裂片狀和星形等等,而且體積巨大,可達100um。
葉綠體由葉綠體外被(chloroplast envelope)、類囊體(thylakoid)和基質(stroma)3部分組成,葉綠體含有3種不同的膜:外膜、內膜、類囊體膜和3種彼此分開的腔:膜間隙、基質和類囊體腔。
葉綠體外被由雙層膜組成,膜間為10~20nm的膜間隙。外膜的滲透性大,如核苷、無機磷、蔗糖等許多細胞質中的營養(yǎng)分子可自由進入膜間隙。
內膜對通過物質的選擇性很強,CO2、O2、Pi、H2O、磷酸甘油酸、丙糖磷酸,雙羧酸和雙羧酸氨基酸可以透過內膜,ADP、ATP已糖磷酸,葡萄糖及果糖等透過內膜較慢。蔗糖、C5糖雙磷酸酯,C糖磷酸酯,NADP+及焦磷酸不能透過內膜,需要特殊的轉運體(translator)才能通過內膜。
是單層膜圍成的扁平小囊,沿葉綠體的長軸平行排列。膜上含有光合色素和電子傳遞鏈組分,又稱光合膜。
許多類囊體象圓盤一樣疊在一起,稱為基粒,組成基粒的類囊體,叫做基粒類囊體,構成內膜系統(tǒng)的基粒片層(grana lamella)?;V睆郊s0。25~0。8μm,由10~100個類囊體組成。每個葉綠體中約有40~60個基粒。
貫穿在兩個或兩個以上基粒之間的沒有發(fā)生垛疊的類囊體稱為基質類囊體,它們形成了內膜系統(tǒng)的基質片層(stroma lamella)。
由于相鄰基粒經網管狀或扁平狀基質類囊體相聯結,全部類囊體實質上是一個相互貫通的封閉系統(tǒng)。類囊體做為單獨一個封閉膜囊的原始概念已失去原來的意義,它所表示的僅僅是葉綠體切面的平面形態(tài)。
類囊體膜的主要成分是蛋白質和脂類(60:40),脂類中的脂肪酸主要是不飽和脂肪酸(約87%),具有較高的流動性。光能向化學能的轉化是在類囊體上進行的,因此類囊體膜亦稱光合膜,類囊體膜的內在蛋白主要有細胞色素b6/f復合體、質體醌(PQ)、質體藍素(PC)、鐵氧化還原蛋白、黃素蛋白、光系統(tǒng)Ⅰ、光系統(tǒng)Ⅱ復合物等。
是內膜與類囊體之間的空間,主要成分包括:
碳同化相關的酶類:如RuBP羧化酶占基質可溶性蛋白總量的60%。
葉綠體DNA、蛋白質合成體系:如,ctDNA、各類RNA、核糖體等。
一些顆粒成分:如淀粉粒、質體小球和植物鐵蛋白等。葉綠體的功能葉綠體(chloroplast):藻類和植物體中含有葉綠素進行光合作用的器官。 主要含有葉綠素、胡蘿卜素和葉黃素,其中葉綠素的含量最多,遮蔽了其他色素,所有呈現綠色。主要功能是進行光合作用。幾乎可以說一切生命活動所需的能量來源于太陽能(光能)。綠色植物是主要的能量轉換者是因為它們均含有葉綠體(Chloroplast)這一完成能量轉換的細胞器,它能利用光能同化二氧化碳和水,合成貯藏能量的有機物,同時產生氧。所以綠色植物的光合作用是地球上有機體生存、繁殖和發(fā)展的根本源泉。
光合作用的是能量及物質的轉化過程。首先光能轉化成電能,經電子傳遞產生ATP和NADPH形式的不穩(wěn)定化學能,最終轉化成穩(wěn)定的化學能儲存在糖類化合物中。分為光反應(light reaction)和暗反應(dark reaction),前者需要光,涉及水的光解和光合磷酸化,后者不需要光,涉及CO2的固定。分為C3和C5兩類。
1。光合色素
類囊體中含兩類色素:葉綠素和橙黃色的類胡蘿卜素,通常葉綠素和類胡蘿卜素的比例約為3:1,chla與chlb也約為3:l,全部葉綠素和幾乎所有的類胡蘿卜素都包埋在類囊體膜中,與蛋白質以非共價鍵結合,一條肽鏈上可以結合若干色素分子,各色素分子間的距離和取向固定,有利于能量傳遞。
在提取和分離葉綠體中色素的實驗中,隨層析液在濾紙上擴散最快的是胡蘿卜素
2。集光復合體(light harvesting complex)
由大約200個葉綠素分子和一些肽鏈構成。大部分色素分子起捕獲光能的作用,并將光能以誘導共振方式傳遞到反應中心色素。因此這些色素被稱為天線色素。葉綠體中全部葉綠素b和大部分葉綠素a都是天線色素。另外類胡蘿卜素和葉黃素分子也起捕獲光能的作用,叫做輔助色素。
3。光系統(tǒng)Ⅱ(PSⅡ)
吸收高峰為波長680nm處,又稱P680。至少包括12條多肽鏈。位于基粒于基質非接觸區(qū)域的類囊體膜上。包括一個集光復合體(light-hawesting comnplex Ⅱ,LHC Ⅱ)、一個反應中心和一個含錳原子的放氧的復合體(oxygen evolving complex)。D1和D2為兩條核心肽鏈,結合中心色素P680、去鎂葉綠素(pheophytin)及質體醌(plastoquinone)。
4。細胞色素b6/f復合體(cyt b6/f complex) 可能以二聚體形成存在,每個單體含有四個不同的亞基。細胞色素b6(b563)、細胞色素f、鐵硫蛋白、以及亞基Ⅳ(被認為是質體醌的結合蛋白)。
5。光系統(tǒng)Ⅰ(PSI)
能被波長700nm的光激發(fā),又稱P700。包含多條肽鏈,位于基粒與基質接觸區(qū)和基質類囊體膜中。由集光復合體Ⅰ和作用中心構成。結合100個左右葉綠素分子、除了幾個特殊的葉綠素為中心色素外外,其它葉綠素都是天線色素。三種電子載體分別為A0(一個chla分子)、A1(為維生素K1)及3個不同的4Fe-4S。
P680接受能量后,由基態(tài)變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài)(P680*),然后將電子傳遞給去鎂葉綠素(原初電子受體),P680*帶正電荷,從原初電子供體Z(反應中心D1蛋白上的一個酪氨酸側鏈)得到電子而還原;Z+再從放氧復合體上獲取電子;氧化態(tài)的放氧復合體從水中獲取電子,使水光解。
2H 2O→O2 + 4H+ + 4e-
在另一個方向上去鎂葉綠素將電子傳給D2上結合的QA,QA又迅速將電子傳給D1上的QB,還原型的質體醌從光系統(tǒng)Ⅱ復合體上游離下來,另一個氧化態(tài)的質體醌占據其位置形成新的QB。質體醌將電子傳給細胞色素b6/f復合體,同時將質子由基質轉移到類囊體腔。電子接著傳遞給位于類囊體腔一側的含銅蛋白質體藍素(plastocyanin, PC)中的Cu2+,再將電子傳遞到光系統(tǒng)Ⅱ。
P700被光能激發(fā)后釋放出來的高能電子沿著A0→ A1 →4Fe-4S的方向依次傳遞,由類囊體腔一側傳向類囊體基質一側的鐵氧還蛋白(ferredoxin,FD)。最后在鐵氧還蛋白-NADP還原酶的作用下,將電子傳給NADP+,形成NADPH。失去電子的P700從PC處獲取電子而還原
以上電子呈Z形傳遞的過程稱為非循環(huán)式光合磷酸化,當植物在缺乏NADP+時,電子在光系統(tǒng)內Ⅰ流動,只合成ATP,不產生NADPH,稱為循環(huán)式光合磷酸化。
一對電子從P680經P700傳至NADP+,在類囊體腔中增加4個H+,2個來源于H2O光解,2個由PQ從基質轉移而來,在基質外一個H+又被用于還原NADP+,所以類囊體腔內有較高的H+(pH≈5,基質pH≈8),形成質子動力勢,H+經ATP合酶,滲入基質、推動ADP和Pi結合形成ATP。
ATP合酶,即CF1-F0偶聯因子,結構類似于線粒體ATP合酶。CF1同樣由5種亞基組成α3β3γδε的結構。CF0嵌在膜中,由4種亞基構成,是質子通過類囊體膜的通道。
現在國際通用名稱為碳反應,而非暗反應。因為該反應在沒有光的時候,會因為缺乏光反應產生的ATP而無法進行。
C3途徑(C3 pathway):亦稱卡爾文(Calvin)循環(huán)。CO2受體為RuBP,最初產物為3-磷酸甘油酸(PGA)。
C4途徑(C4 pathway) :亦稱哈奇-斯萊克(Hatch-Slack)途徑,CO2受體為PEP,最初產物為草酰乙酸(OAA)。
景天科酸代謝途徑(Crassulacean acid metabolism pathway,CAM途徑):夜間固定CO2產生有機酸,白天有機酸脫羧釋放CO2,進行CO2固定。
線粒體與葉綠體都是細胞內進行能量轉換的場所,兩者在結構上具有一定的相似性。①均由兩層膜包被而成,且內外膜的性質、結構有顯著的差異。②均為半自主性細胞器,具有自身的DNA和蛋白質合成體系。因此綠色植物的細胞內存在3個遺傳系統(tǒng)。
葉綠體DNA由Ris和Plaut 1962最早發(fā)現于衣藻葉綠體。ctDNA呈環(huán)狀,長40~60μm,基因組的大小因植物而異,一般約200Kb-2500Kb。數目的多少植物的發(fā)育階段有關,如菠菜幼苗葉肉細胞中,每個細胞含有20個葉綠體,每個葉綠體含DNA分子200個,但到接近成熟的葉肉細胞中有葉綠體150個,每個葉綠體含30個DNA分子。
和線粒體一樣,葉綠體只能合成自身需要的部分蛋白質,其余的是在細胞質游離的核糖體上合成的,必需運送到葉綠體,才能發(fā)揮葉綠體應有的功能。已知由ctDNA編碼的RNA和多肽有:葉綠體核糖體中4種rRNA(23S、16S、4.5S及5S),20種(煙草)或31種(地錢)tRNA,約90多種多肽。
由于葉綠體在形態(tài)、結構、化學組成、遺傳體系等方面與藍細菌相似,人們推測葉綠體可能也起源于內共生的方式,是寄生在細胞內的藍藻演化而來的。
在個體發(fā)育中葉綠體由原質體發(fā)育而來,原質體存在于根和芽的分生組織中,由雙層被膜包圍,含有DNA,一些小泡和淀粉顆粒的結構,但不含片層結構,小泡是由質體雙層膜的內膜內折形成的。
在有光條件原質體的小泡數目增加并相互融合形成片層,多個片層平行排列成行,在某些區(qū)域增殖,形成基粒,變成綠色原質體發(fā)育成葉綠體。
在黑暗性長時,原質體小泡融合速度減慢,并轉變?yōu)榕帕谐删W格的小管的三維晶格結構,稱為原片層,這種質體稱為黃色體。黃色體在有光的情況下原片層彌散形成類囊體,進一步發(fā)育出基粒,變?yōu)槿~綠體。
葉綠體能靠分裂而增殖,這各分裂是靠中部縊縮而實現的,在發(fā)育7天的幼葉的基部2-2。5cm處很容易看到幼齡葉綠體呈啞鈴形狀,從菠菜幼葉含葉綠體少、ctDNA多,老葉含葉綠體多,每個葉綠體含ctDNA少的現象也可以看出葉綠體是以分裂的方式增殖的。
成熟葉綠體正常情況下一般不再分裂或很少分裂。
高等植物的葉綠體主要存在于葉肉細胞內,含有葉綠素。電鏡觀察表明:葉綠體外有光滑的雙層單位膜,內膜向內疊成內囊體,若干內囊體垛疊成基粒?;鹊哪承﹥饶殷w內向外伸展,連接不同基粒。連接基粒的類囊體部分,稱為基質片層;構成基粒的類囊體部分,稱為基粒片層。
在個體發(fā)育上,葉綠體來自前質體,由前質體發(fā)育成葉綠體。
并且,無光不能形成葉綠素。
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