涼血化瘀法和補(bǔ)腎法對腎小球腎炎大鼠血液流變學(xué)的影響
健行中醫(yī)康復(fù)養(yǎng)生------2010-10-28
北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報 1999年第4期第22卷 中醫(yī)藥實驗研究
作者：彭建中 張家瑋 魏民 王謙
單位：北京中醫(yī)藥大學(xué) 北京100029
關(guān)鍵詞：涼血化瘀法；補(bǔ)腎法；腎小球腎炎；血液流變學(xué)；大鼠
摘要：采用大鼠腎毒血清性實驗?zāi)Ｐ停譃闆鲅鲋委熃M、補(bǔ)腎治療組和空白對照組，各灌服8周后殺檢，測定各組血液流變學(xué)指標(biāo)并進(jìn)行組間比較。結(jié)果表明：涼血化瘀治療組各項血液流變學(xué)指標(biāo)(全血粘度、血漿比粘度、紅細(xì)胞壓積、纖維蛋白原含量)均明顯優(yōu)于病理組，組間比較具有顯著性差異；補(bǔ)腎組和病理組之間相比無顯著性差異。說明涼血化瘀法對于實驗性腎小球腎炎大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的改善作用強(qiáng)于補(bǔ)腎法。
Effect of TCM Method Cooling the Blood and Dissipating Blood Stasis and Kidney-Tonifying on Hemorrheology of the Rat with Experimental Glomerulonephritis
Peng Jianzhong Zhang Jiawei Wei Min et al.
(Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100029)
ABSTRACT: Dividing the experimental nephrolytic serum rat models into 3 groups: treatment group with cooling the blood and dissipating blood stasis method, group with kidney-tonifying method and the blank control group, after filling for 8 weeks put them to death and then assay the hemorrheology indices of each group. The results show the hemorrheology indices of treatment group with cooling the blood and dissipating blood stasis method, which include whole blood viscosity, plasma comparing viscosity, hematocrit and fibrinogen content, are all markedly better than pathological group. The inter-group comparison also differs greatly. But there is no obvious difference between the group with kidney-tonifying method and the blank control group. It indicates that the TCM method of cooling the blood and dissipating blood stasis is more effective than the kidney-tonifying method on improving the rat hemorrheology indices with experimental glomerulonephritis.
KEY WORDS: Cooling the blood and dissipating blood stasis; Kidney-tonifying; Glomerulonephritis; Hemorrheology; Rat
北京中醫(yī)藥大學(xué)趙紹琴教授用涼血化瘀法治療慢性腎小球腎炎，臨床療效顯著；而補(bǔ)腎法作為慢性腎炎的常用治療方法在臨床被廣泛應(yīng)用［1］。我們通過動物實驗，觀察涼血化瘀法和補(bǔ)腎法對腎小球腎炎模型大鼠血液流變學(xué)多項指標(biāo)的不同影響，探討其作用機(jī)理，為臨床辨治慢性腎炎提供實驗依據(jù)。
1 材料與方法
1.1 實驗材料
1.1.1 動物：純系雄性SD大鼠150～200g，中國科學(xué)院動物研究所提供；雄性新西蘭白兔2.5kg，中國藥品生物制品檢定所提供。
1.1.2 藥物：以涼血化瘀法組方的“腎炎1號”主要由小薊、赤芍、丹參、紫草等組成。常規(guī)煎煮2次，合并煎液濃縮成每100mL溶液含50g生藥；補(bǔ)腎法方藥選用六味地黃丸(山藥、山茱萸、熟地黃、丹皮、茯苓、澤瀉)，常規(guī)煎煮2次，合并煎液濃縮成每100mL溶液含100g生藥。藥液制得后，均冰箱保存，加溫后使用。所用藥物均購自北京同仁堂藥店。
1.2 實驗方法
1.2.1 腎毒血清的制備：參考 Clarke方法［2］，復(fù)制改進(jìn)型腎毒血清性腎小球腎炎動物模型。正常雄性SD大鼠，10%水合氯醛(3mL/kg)麻醉。無菌條件下，生理鹽水腹主動脈灌流至腎無血色，摘取腎臟，剝離腎皮質(zhì)，加入少量生理鹽水置勻漿器內(nèi)制成勻漿。等量勻漿與弗氏完全佐劑充分混勻制成油包水乳劑，兔腳掌皮下多點注射。以后用不完全佐劑與等量勻漿充分混勻，每兩周背部皮下多點注射1次。1月后，兔耳中動脈取血1mL，用瓊脂雙擴(kuò)散法(Agar Diffusion Test)檢測血清抗體效價。若達(dá)到1∶16即可自頸動脈放血；若達(dá)不到1∶16則需繼續(xù)免疫，直到達(dá)到滿意效價。放血完畢，立即于4℃，5000～10000r/min低溫高速離心機(jī)中離心30min，收集上清液，即為兔抗大鼠腎毒血清。分裝至無菌小瓶內(nèi)，標(biāo)明效價及制取時間，低溫凍存?zhèn)溆谩?br> 1.2.2 模型制作：70mg兔IgG溶于7mL生理鹽水中，與13mL不完全佐劑充分混勻，每只大鼠0.22 mL皮下多點注射。5d后，一次性尾靜脈注射兔抗大鼠腎毒血清3mL/kg。此后，皮下注射6-氨基己酸2g/kg，連續(xù)7d(首次在注射腎毒血清前2h進(jìn)行)。
1.2.3 實驗分組：將實驗大鼠隨機(jī)分為病理組、涼血化瘀治療組、補(bǔ)腎法治療組、正常組，每組10只。前3組均按上述方法造模。造模成功后，即兩組大鼠全部出現(xiàn)顯著性蛋白尿，部分血清生化檢測結(jié)果(如血清膽固醇)與正常組相比較出現(xiàn)顯著性差異時，涼血化瘀治療組開始灌服“腎炎1號”，補(bǔ)腎法治療組開始灌服六味地黃煎液，4組同期作對照觀察。
1.2.4 給藥方法：參考有關(guān)文獻(xiàn)［3］，涼血化瘀治療組每次灌胃“腎炎1號”1.8mL/只，每日1次；補(bǔ)腎法治療組每次灌胃六味地黃水煎液1.5mL/只，每日1次，連續(xù)8周。病理組和正常組均用等量生理鹽水灌胃，直至第8周實驗結(jié)束。
1.2.5 指標(biāo)測定：實驗結(jié)束時(第8周)，各組大鼠頸動脈取血，4mL/只，枸椽酸抗凝(濃度38%)，溫控于37.6℃，測定血液流變學(xué)指標(biāo)。
2 結(jié)果
實驗第8周末殺檢，進(jìn)行血液流變學(xué)指標(biāo)測定。結(jié)果表明，病理組、涼血化瘀治療組、補(bǔ)腎法治療組大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)組間比較出現(xiàn)顯著差異。涼血化瘀治療組全血粘度值明顯降低，不僅低于病理組，而且低于正常組；補(bǔ)腎法治療組該項測定指標(biāo)雖亦低于病理組，但高于涼血化瘀治療組及正常組。涼血化瘀治療組血漿比粘度值較病理組明顯降低(見表1)；涼血化瘀治療組紅細(xì)胞壓積值明顯高于病理組；纖維蛋白原含量較病理組、正常組均明顯降低；補(bǔ)腎法治療組測定結(jié)果與病理組無統(tǒng)計學(xué)意義(見表2)。
表1 各組全血粘度、血漿比粘度測定結(jié)果 (mpa.s;±s)
組 別n全血粘度血漿比粘度
低切變率3.6s-1中切變率36s-1高切變率210s-1
病理組931.917±22.07416.291±9.0826.753±1.3471.812±0.060
涼血化瘀組97.667±3.380△△**5.109±0.964△△**3.097±0.840△△**1.360±0.118△△*
補(bǔ)腎法組923.317±5.846△△12.161±6.376△△6.676±0.3241.759±0.158
正常組914.597±5.817△△8.892±3.099△△5.621±0.822△1.414±0.043△△
注：與病理組比較△P＜0.05 △△P＜0.01;與補(bǔ)腎法組比較*P＜0.05 **P＜0.01
表2 各組紅細(xì)胞壓積、纖維蛋白原含量測定結(jié)果 (n=9；±s)
組 別紅細(xì)胞壓積/%纖維蛋白原含量/mg/%
病理組33.333±3.162486.111±187.646
涼血化瘀組38.667±2.345△△**255.556±156.294△△**
補(bǔ)腎法組33.500±2.777460.238±100.720
正常組37.000±3.775△△306.137±86.120△△
注：與病理組比較△△P＜0.01;與補(bǔ)腎法組比較**P＜0.01
3 討 論
以涼血化瘀法治療慢性腎炎是趙紹琴教授的成功經(jīng)驗。認(rèn)為慢性腎炎并非腎虛，而是由于外邪入侵，久留不去，郁而化熱，深入血分所致。分析其病機(jī)為熱入血分、絡(luò)脈瘀阻［4］。針對這一病機(jī)，確立以涼血化瘀法為基本治則，采用赤芍、丹參、紫草、小薊等具有涼血化瘀作用的藥物為主組方進(jìn)行治療，臨床上取得了滿意療效。該治法的顯著特點是不用傳統(tǒng)的補(bǔ)腎藥物，當(dāng)屬臨床辨治慢性腎炎的新思路。本項研究設(shè)計以涼血化瘀法和補(bǔ)腎法對同一腎炎模型——腎毒血清性腎炎大鼠進(jìn)行同步對照實驗觀察，通過對比兩者對實驗大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的不同影響，以期初步探討涼血化瘀法治療慢性腎炎的作用機(jī)制。
實驗結(jié)果表明：注射腎毒血清后第8周，病理組大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)較正常組出現(xiàn)明顯的改變，表現(xiàn)為全血粘度增高，血漿比粘度增高，纖維蛋白原含量增高，紅細(xì)胞壓積降低；而涼血化瘀治療組大鼠的全血粘度與纖維蛋白原含量兩項測定結(jié)果，不僅低于病理組、補(bǔ)腎法治療組，而且還低于正常組；同時，組間兩兩比較均有顯著性差異。涼血化瘀治療組的血漿比粘度同正常組相比，有降低的趨勢；紅細(xì)胞壓積值同正常組相比，有升高的趨勢。尤其值得注意的是，我們發(fā)現(xiàn)涼血化瘀治療組紅細(xì)胞壓積增大的同時，全血粘度值反而降低，這說明涼血化瘀方藥在增強(qiáng)紅細(xì)胞變形能力和柔韌性、削弱紅細(xì)胞聚集能力等方面，具有一定的作用。而補(bǔ)腎方藥治療組除全血粘度值低于病理組之外，其他各項血液流變學(xué)檢測結(jié)果均接近病理組，同病理組相比組間差異不大。
現(xiàn)代研究已經(jīng)證明，血液的高凝狀態(tài)在慢性腎小球疾病的發(fā)病機(jī)理中起著不可忽視的重要作用［5］。這種高凝狀態(tài)的存在，破壞了正常的血液循環(huán)，使大量的血液瘀積在腎小球毛細(xì)血管網(wǎng)中，不利于病變腎臟的修復(fù)。同時，腎內(nèi)毛細(xì)血管的阻塞、塌陷、皺縮，不僅促使腎小球逐漸發(fā)生硬化、纖維化，而且進(jìn)一步加重了血液的瘀滯程度，導(dǎo)致更為嚴(yán)重的微循環(huán)障礙。如此互為因果的病理變化，必將對腎小球的正常血液供應(yīng)及其濾過功能產(chǎn)生不良影響，成為加重腎臟病理損害，加速腎功能惡化的重要因素。因此，改善血液高凝狀態(tài)，對于促進(jìn)病變腎臟的修復(fù)，控制病情的發(fā)展，具有重要意義。本研究證明涼血化瘀法能夠明顯改善實驗性腎炎大鼠的全血粘度、血漿比粘度、紅細(xì)胞壓積、纖維蛋白原含量等各項血液流變學(xué)指標(biāo)，其作用均明顯優(yōu)于補(bǔ)腎法。提示涼血化瘀法對于血液流變學(xué)各項指標(biāo)的改善作用可能是其治療慢性腎炎的作用機(jī)制之一。
作者簡介：彭建中，49歲，醫(yī)學(xué)碩士，副教授，碩士研究生導(dǎo)師。
參考文獻(xiàn)
1 張家瑋.慢性腎炎的中醫(yī)臨床研究概況.國醫(yī)論壇，1999，14(1)：45～46
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3 陳 奇.中藥藥理研究方法學(xué).北京：人民衛(wèi)生出版社，1993.33
4 彭建中.慢性腎病新論.美國中醫(yī)藥研究，1998，1(2)：75～76
5 洪淑云，李仁康，陳思源，等.活血化瘀法為主治療慢性腎炎腎功能損害的臨床觀察.中醫(yī)雜志，1988，29(4)：31～32
本文來自:大眾醫(yī)藥網(wǎng)
http://www.51qe.cn/pic/30/15/15/14/11/0851.htm
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