你是否也在手術(shù)后直接扔掉了腫瘤組織？

你知道體內(nèi)最寶貴的免疫細胞也被一同扔掉了嗎？

重要提示！

99%的腫瘤患者都不知道，自己手術(shù)切除的腫瘤組織中深藏著殺癌能力最強的一群免疫細胞，腫瘤浸潤淋巴細胞（TIL）。

而幾乎所有患者的腫瘤組織在手術(shù)后僅取一小部分做成病理蠟塊，其余部分就直接作為醫(yī)療垃圾處理掉，浪費了我們自身寶貴的抗癌資源！

建議大家在手術(shù)前爭得手術(shù)醫(yī)生的同意，將新鮮手術(shù)組織保存，交由專業(yè)機構(gòu)將TIL細胞提取，可以在術(shù)后回輸預(yù)防復(fù)發(fā)，或者是先凍存起來，以備未來不時之需。因為手術(shù)后未經(jīng)其他治療時新鮮組織中的TIL細胞對腫瘤的殺傷能力才是最強的，一旦接受化療和放療，免疫細胞的殺傷能力會被削弱。

深藏在實體腫瘤中的“寶藏”-腫瘤浸潤淋巴細胞（TIL）

TIL(Tumorinfiltrating lymphocytes)指腫瘤浸潤的淋巴細胞。

“在癌癥的早期階段，免疫系統(tǒng)試圖通過動員淋巴細胞的特殊免疫細胞來攻擊腫瘤。在手術(shù)切除的腫瘤組織中，我們發(fā)現(xiàn)大部分是腫瘤細胞，也有少部分淋巴細胞。這些淋巴細胞中有部分是針對腫瘤特異性突變抗原的T細胞，它們才是深入到敵軍內(nèi)部打擊能力最強的免疫細胞，也是深藏在腫瘤中的寶藏！--免疫學泰斗，美國癌癥研究院的外科主任Steven Rosenberg博士。”

TILs細胞具有多克隆化，可特異性識別多種新生抗原，個體化，高度特異性，持久性，輸注后可形成免疫記憶等特點。

為什么一定要在手術(shù)后將TILs細胞儲存起來？它能做什么？?

研究表明，TILs細胞的數(shù)量會隨著腫瘤的進展逐漸降低。并且手術(shù)后接受的輔助性放化療在殺傷癌細胞的同時也會殺死正常細胞和體內(nèi)的免疫細胞。

一項針對宮頸癌的TILs治療與腫瘤分期的研究，發(fā)現(xiàn)腫瘤末期的TILs中CD4+和CD8+細胞數(shù)量顯著降低。

另一項針對黑色素瘤TILs治療與腫瘤分期的研究發(fā)現(xiàn)，T，NK細胞數(shù)量都會隨著腫瘤的進展顯著降低。

因此，腫瘤患者在手術(shù)后第一時間將腫瘤組織中殺癌能力最強的這部分TILs細胞儲存起來，在手術(shù)后或癌癥復(fù)發(fā)時擴增回輸?shù)襟w內(nèi)，這將是戰(zhàn)勝癌癥最寶貴的機會之一。

什么是TILs細胞療法？

提起近兩年聲名大噪的的免疫療法，很多人可能都已經(jīng)知道PD-1和CAR-T，但這只是冰山一角，雖然PD-1讓一部分幸運的晚期患者獲得了免死金牌。但不盡人意的是，PD-1僅對20%~30%的患者起效；CAR-T療法雖然給血液腫瘤帶來了“治愈”希望，但是在占比高達90%的實體瘤中暫時沒有突破性的進展。在實體腫瘤中最具潛力的TILS（腫瘤浸潤淋巴細胞）療法近兩年終于打破了這一僵局。

科學家現(xiàn)在已經(jīng)研發(fā)出體外培養(yǎng)方法，把這些腫瘤組織中的特異性淋巴細胞TILs富集起來，再擴增回輸給患者，就能夠發(fā)揮抗腫瘤作用，而且聯(lián)合PD-1效果會更好，這就是大名鼎鼎的TILs細胞療法。

Rosenberg教授解釋說，雖然其他類型的細胞免疫療法使用血液中的循環(huán)T細胞不同，TIL治療依賴于從患者身上取得的新鮮腫瘤組織。切除后，對從腫瘤活檢組織中分離的腫瘤細胞DNA進行測序，以鑒定出在癌癥中發(fā)現(xiàn)的突變。然后將突變的新抗原插入自體樹突狀細胞中，并與從腫瘤活檢中分離的TILs共培養(yǎng)。然后通過其分泌的細胞因子（例如干擾素γ）來檢測TIL的新抗原特異性識別，最終篩選出能夠識別新抗原的TILs細胞，進行擴增，輸回患者體內(nèi)。簡而言之，TIL治療利用能夠識別并靶向患者腫瘤的T細胞作為攻克癌癥的免疫大軍回輸?shù)襟w內(nèi)，是根據(jù)每個癌癥患者量身定制的個體化抗癌療法。

它的開創(chuàng)者正是免疫界泰斗Rosenberg及其團隊。

Steven Rosenberg（NCI）

資料顯示，老爺爺今年已經(jīng)78歲了，是世界著名的癌癥學和免疫學專家，也是美國癌癥研究院（NCI）的外科主任。

Rosenberg認為，癌細胞入侵時，自身的免疫系統(tǒng)會試圖打敗體內(nèi)蔓延的腫瘤。

過去三十年間，他和他的團隊一直在致力做一件事情：如何發(fā)現(xiàn)并放大“打敗”工作做得最好的那部分免疫系統(tǒng)細胞。這就是TIL--瘤浸潤的淋巴細胞.

TILs療法與其他細胞免疫療法有哪些不同？

腫瘤的CAR-T，NK細胞療法已經(jīng)為大家所熟知，而TIL是完全不同于傳統(tǒng)細胞療法的一類新型療法。

1.殺傷能力更強

TIL的免疫細胞來自于腫瘤組織，而其他細胞免疫療法大部分來取自血液，這直接決定了免疫細胞識別腫瘤的能力。據(jù)估計，腫瘤里分離出的免疫細胞，有60%以上能識別腫瘤，而血液里面分離的免疫細胞，不到0.5%。

2.找到特定突變，精準識別

這種新型的療法不是像傳統(tǒng)的簡單的擴增回輸，而是要確定患者病例中特定的突變。之后利用突變信息找到能夠最有效瞄準這些突變的T細胞，最后提取出專門患者腫瘤中細胞突變的T細胞，這些細胞具有精準識別癌細胞的能力。

Rosenberg對常見胃腸道癌的患者的研究證明了不同患者之間免疫應(yīng)答的獨特性。通過對75位患者的生物學樣本進行全外顯子測序，確定了124個新抗原的TIL。他們發(fā)現(xiàn)，83％（62）的患者培養(yǎng)的TIL能夠試別自體腫瘤細胞表達的1.6％的體細胞突變。99%的新抗原決定簇在每個癌癥患者中都是完全不同的。因此，必須從每個癌癥患者中取出細胞，確定哪些細胞可以真正識別和攻擊癌癥，將這些細胞進行培養(yǎng)，擴增才能起到治療效果，這是非常復(fù)雜的。

3.強強聯(lián)合，殺癌效果倍增！

這些免疫細胞經(jīng)過體外培養(yǎng)后，重新注入到患者體內(nèi)。同時，研究團隊聯(lián)合使用了免疫增強藥物白細胞介素2和另一種“明星抗癌藥”PD-1抑制劑Keytruda，Keytruda即屬于另一種免疫療法免疫檢查點阻斷，在某些癌癥中有顯著的效果。

基于上述操作過程，該新療法被認為是為患者“量身定制”。

TILs療法究竟是如何治療腫瘤的?？

第一步，我們得到病人的腫瘤組織塊，其中混雜著體積較大的腫瘤細胞（淺藍色）以及體積小而圓的T淋巴細胞（紅色，綠色，深藍色）；

第二步，腫瘤樣本被運送到專有的GMP設(shè)施，在那里TIL被分離并繁殖，將不同種類的T淋巴細胞在細胞板上克隆化，并加入高濃度的IL-2來選擇培養(yǎng)，在三周內(nèi)產(chǎn)生數(shù)十億TIL。

第三步，在IL-2的刺激下不同種類的T淋巴細胞都得到了克隆擴增，形成了細胞群；

第四步，用病人的腫瘤細胞和擴增后的T淋巴細胞反應(yīng)，凡是能夠發(fā)生殺瘤效應(yīng)的T淋巴細胞群作為陽性TIL群留下（紅色），其余的丟棄（綠色，深藍色）；

第五步，用負載了腫瘤特異性抗原的樹突狀細胞（DC）進一步擴增培養(yǎng)腫瘤特異性的TIL；

第六步，患者開始一周的預(yù)處理治療（清髓）以準備接受TIL.TIL產(chǎn)品作為一次性療法施用，在TIL輸注后立即接受多達6劑白細胞介素2（IL-2），來支持患者體內(nèi)TIL的生長和激活。

“治愈”實體腫瘤的新希望-TILs療法臨床數(shù)據(jù)驚艷

TILs療法對于多種臨床上難治的實體腫瘤取得了驚艷四座的臨床效果。去年的ASCO會議上，基于TILS細胞的創(chuàng)新型療法LN-145和LN-144(Lifileucel）在治療宮頸癌和黑色素瘤的臨床結(jié)果一經(jīng)公布，就引起了醫(yī)學界的廣泛關(guān)注，其中黑色素瘤中的TIL治療具有持續(xù)數(shù)十年的完全應(yīng)答（CR）的潛力，這種長期的作用歸功于記憶T細胞的持久性。我們一起來看看TILs療法目前在各類實體腫瘤中取得的進展。

一，黑色素瘤--1988年初次嘗試，有望實現(xiàn)臨床治愈！

1986年的體外研究表明，從手術(shù)切除的惡性黑色素瘤中獲得的人源TILs含有能夠特異性識別自體腫瘤的T淋巴細胞，當存在大量的腫瘤浸潤淋巴細胞時，表明機體啟動了對抗腫瘤的免疫反應(yīng)。

這些研究使得Rosenberg1988年首次證明使用自體TILs的過繼性T細胞療法可以介導(dǎo)轉(zhuǎn)移性惡性黑色素瘤患者的腫瘤客觀消退。這意味著，實體腫瘤的克星-TILs療法正式誕生。

2009年Rosenberg教授發(fā)表的針對黑色素瘤的三項連續(xù)的臨床試驗中，接受TILs治療的客觀緩解率在49％至72％之間。其中25名接受TILs療法的試驗中，有7名（28％）達到了完全緩解！值得一提的是，完全患者的患者大部分可達到臨床治愈！其中一位患者在接受治療的12天腫瘤就出現(xiàn)了迅速的縮小。

目前，美國國家癌癥研究所NCI在這方面已經(jīng)取得了非常大的成功，并且已在其他主要癌癥中心實施治療，例如Moffitt癌癥中心。

2011年，美國國家癌癥研究所（NCI）外科主任Steven A. Rosenberg團隊發(fā)表在國際頂級期刊《Clinical cancer research》上的對于轉(zhuǎn)移性黑色素瘤的2期臨床研究顯示，TIL治療黑色素瘤患者的客觀緩解率（ORR）為56％，完全緩解率（CR）高達24％。并且研究表明，浸潤腫瘤的免疫細胞數(shù)量與患者的生存機會成正比。黑色素瘤是具有相對高的突變負荷的癌癥之一，腫瘤被這些免疫細胞潤，參與早期試驗的一些患者對這種療法的反應(yīng)持續(xù)了十多年。

此后，Iovance公司基于自體腫瘤浸潤淋巴細胞（TIL）專門針對黑色素瘤研發(fā)了Lifileucel（LN-144）免疫療法。在今年的ASCO會議上，基于TILS細胞的創(chuàng)新型療法LN-144(Lifileucel）更新了黑色素瘤的臨床結(jié)果，再次引起了轟動。

C-144-01是一項2期臨床試驗，招募66名已被診斷患有IIIc期或IV期轉(zhuǎn)移性黑色素瘤的患者。這些患者的特點是至少接受了3~4種全身性治療都失敗后的患者，所有人都接受過PD-1抑制劑治療，80%接受過CTLA-4抑制劑 ，23%的患者接受過BRAF / MEK抑制劑，可以說是臨床上用盡了治療方案，山重水復(fù)疑無路的極晚期患者。還有44%的患者存在肝或腦轉(zhuǎn)移。

該臨床試驗旨在確定TIL治療療法LN-144是否安全有效地治療轉(zhuǎn)移性黑色素瘤（幫助患者延長壽命和/或減緩癌癥進展）。

這些患者在接受手術(shù)后，將腫瘤組織中的TIL細胞進行培養(yǎng)后回輸，平均注入的TIL細胞：28 x 10^9；IL-2劑量：6次。

實驗結(jié)果

不負眾望！在最新報道的66例接受過PD-1治療晚期黑色素瘤患者的試驗中，結(jié)果顯示：

疾病控制率（DCR）高達80.3％；

客觀緩解率達到36.4%；

中位隨訪時間為8.8個月，未達到中位反應(yīng)持續(xù)時間。

更引人注目的是，患有PD-L1陰性的患者也有響應(yīng)，這說明對免疫檢查點抑制劑無效的患者仍能獲益于TIL療法。

對于PD-1治療后進展的患者，幾乎沒有其他治療選擇，這種治療方案的效果幾乎無與倫比。

一位晚期黑色素瘤患者腫瘤在治療前出現(xiàn)廣泛轉(zhuǎn)移，在接受TILs療法后一個月病灶明顯縮小，治療6個月達到完全緩解，治療兩年后仍然處于完全緩解狀態(tài)，并且體內(nèi)持續(xù)存在腫瘤反應(yīng)性CD8 + T細胞。

二，宮頸癌-首次獲FDA突破治療指定，有望上市！

Iovance公司基于自體腫瘤浸潤淋巴細胞（TIL）研發(fā)的另一款針對其他實體腫瘤的療法稱為LN-145。

2019年6月，F(xiàn)DA基于innovaTIL-04（C-145-04）積極的試驗的數(shù)據(jù)，治療晚期宮頸癌患者的反應(yīng)率（ORR）高達44％，授予腫瘤浸潤淋巴細胞（TIL）治療方法LN-145為突破性的治療指定，這是用于實體瘤的細胞免疫療法首次獲此殊榮。Iovance Biotherapeutics公司與FDA進行討論之后宣布重大喜訊：FDA支持LN-145治療晚期宮頸癌的監(jiān)管申請。這一反饋讓Iovance公司可能在2020年下半年為LN-145遞交生物制劑許可申請（BLA），加快其上市的進程，一旦FDA批準，這將是首款用于實體瘤的細胞免疫療法，將給癌癥患者帶來巨大的生存獲益。

第二階段innovaTIL-04（C-145-04）積極的試驗在2019年2月4日的數(shù)據(jù)截止時，有27名可評估的患者。平均注入的TIL細胞：28 x 109；IL-2劑量：6次。

結(jié)果顯示：

• 客觀緩解率（ORR）44%，完全緩解率（CR）11%，疾病控制率（DCR）高達85%。即12名的患者有效果，包括1名完全應(yīng)答，9名部分應(yīng)答和2個未確認的部分應(yīng)答；
• 中位隨訪時間為3.5個月，12例患者中有11例持續(xù)應(yīng)答；
• 沒有任何嚴重的副作用發(fā)生。

一名患有轉(zhuǎn)移性鱗狀細胞癌并接受了多種聯(lián)合化療方案，包括順鉑，長春新堿和博來霉素，然后用吉西他濱加順鉑聯(lián)合放療。隨后發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移，包括主動脈旁，雙側(cè)肺門，顱下和髂骨部位（圖1A和1C）。治療后，她在所有疾病部位都完全消退（圖1A和1C）。

另一患者患有轉(zhuǎn)移性腺癌。她的原發(fā)性腫瘤對化放療無效。隨后轉(zhuǎn)移到更多的腹膜后淋巴結(jié)和肝臟表面，在TIL治療前，她在腹膜后，腹壁，旁系，肝旁和盆腔部位有腫瘤進展（圖1B和1d）。在治療后，出現(xiàn)完全的臨床緩解（圖1B和1d）。原文鏈接：疾病控制率89%！首個迎戰(zhàn)實體瘤的細胞免疫療法獲FDA突破性療法稱號！

值得振奮的是，在化療期間或之后進展的宮頸癌患者的治療選擇有限，之前報道的晚期宮頸癌化療或免疫治療二線治療的應(yīng)答率僅在4％-14％之間。而這款新型的非常安全的細胞免疫療法為晚期宮頸癌患者帶來了44%的應(yīng)答率，并且在一些患者中表現(xiàn)出持久的應(yīng)答效果，研究人員表示這種治療方式可以實現(xiàn)長期疾病控制的希望。希望這款療法能盡快獲批上市。

三，非小細胞肺癌-為PD-1耐藥的患者再續(xù)生存期

肺癌是全球發(fā)病和死亡最高的癌癥，盡管近年來靶向和免疫治療發(fā)展已經(jīng)讓肺癌越來越趨于慢性病的治療，但是對于一些患者來說，當最后的保底藥物PD-1發(fā)生耐藥后，仍讓患者們感到恐慌。

美國時間4月27日，在今年的AACR會議上，一項由美國知名癌癥中心莫菲特癌癥研究中心（H. Lee Moffitt ）開展的基于TIL細胞治療的Ⅰ期臨床結(jié)果公布：

在12名可評估的非小細胞肺癌患者中，TIL療法可達到25%的總緩解率，其中兩名患者達到持久的完全緩解。

盡管這項研究規(guī)模很小，但還是令腫瘤學家們感到振奮，因為這些患者都是臨床上已經(jīng)接受過PD-1（Opdivo）治療后病情進展的晚期患者，這些患者可以說是山重水復(fù)疑無路，最為難治的患者群體了。

當從這些患者體內(nèi)的腫瘤病灶中提取出抗癌能力超強的TILs細胞，并在體外擴增培養(yǎng)成數(shù)十億有著精準殺傷能力的免疫大軍，回輸?shù)襟w內(nèi)作戰(zhàn)時，大部分患者在首次TIL治療后進行 CT掃描就開始出現(xiàn)明顯的腫瘤消退。

這項試驗共有32名患者參加，最終有16名患者接受TILS治療，其中12名患者可以評估。在平均隨訪1.4年時，3名患者病情緩解，其中兩名完全患者，并且已超過一年。另一名患者的緩解即將得到確認。

大部分患者在接受TILs治療后，腫瘤病灶都有所縮小，在接受治療后的第一次CT掃描時，腫瘤病灶直徑平均縮小38%！

因此，在PD-1治療后，TILs療法仍具有令晚期轉(zhuǎn)移性非小細胞肺癌達到持久緩解的能力，這是非常了不起的，期待這款療法能加大研究，早日獲批上市，為晚期患者的生命持續(xù)續(xù)航！

TILs療法最新臨床試驗招募信息

目前，這款新型的免疫療法暫未上市，但在全球范圍內(nèi)開展了多項針對各類實體腫瘤（非小細胞肺癌，結(jié)直腸癌，卵巢癌，黑色素瘤...)的臨床試驗。大家可以致電全球腫瘤醫(yī)生網(wǎng)醫(yī)學部了解詳情。

（正在進行的各項臨床研究進展）

申請流程如下：

1.按要求將病歷資料提交至全球腫瘤醫(yī)生網(wǎng)醫(yī)學部；

2.醫(yī)學部初步評估后匹配合適的臨床試驗；

3.向相應(yīng)的試驗中心提交病歷資料；

4.評估通過后協(xié)助患者參加臨床試驗。

免疫腫瘤學的潛力剛剛開始實現(xiàn),揭開更多的冰山將會更加詳細地了解如何控制免疫反應(yīng)，以及將將這些治療手段用于臨床獲得益處。每天我們能看到更多的進展，我們相信這種治療方法將在未來幾年取得重大突破，讓我們共同期待。