看了
論壇里有些帖子都談到RNA提取前的樣品保存問題,有的因試驗(yàn)條件所限(如液氮、-80度條件達(dá)不到),我的試驗(yàn)中也有這樣的問題,把我經(jīng)驗(yàn)介紹給大家,也歡迎大家跟貼,說說自己的經(jīng)驗(yàn)。
1.我看到文獻(xiàn)中有用sigma公司的RNAlater。
RNAlater? is an aqueous, non-toxic tissue storage
reagent that rapidly permeates tissue to stabilize and
protect cellular RNA in situ in unfrozen specimens.
Tissue pieces are harvested and immediately
submerged in RNAlater for storage without
jeopardizing the quality or quantity of RNA. RNAlater
eliminates the need to immediately process tissue
specimens or to freeze samples in liquid nitrogen for
later processing.
RNAlater preserves RNA in tissues for up to 1 day at
37 °C, 1 week at 25 °C, and 1 month or more at 4 °C.
Tissues can also be stored at –20 °C or at –80 °C
long-term.
RNAlater has been extensively tested on tissues from
several vertebrate species, including brain, heart,
kidney, spleen, liver, testis, skeletal muscle, fat, lung
and thymus. RNAlater is also effective for E. coli,
Drosophila, tissue culture cells, white blood cells, and
some plants.
RNAlater is compatible with most RNA isolation
methods, including TRI Reagent? * and GenElute total
RNA isolation and mammalian mRNA isolation kits.
具體說明可到sigma的網(wǎng)站找,它的產(chǎn)品編號(hào)(Product Code )R 0901。
我也問過這里的代理商,估計(jì)兩百多大洋。
2.如果錢不多,可以用國產(chǎn)的RNAIN: 非凍型RNA樣品保存液 ,是深圳華氏的。
主要用途 在非凍狀態(tài)下保持新鮮組織細(xì)胞中RNA分子的完整性。
作用原理 迅速滲入新鮮組織細(xì)胞的胞漿中, 抑制RNA分子的降解。
性能指標(biāo) 使新鮮組織細(xì)胞中RNA的完整性在37℃下保存一天, 在25℃下保存一周, 4℃下保存一個(gè)月, 在-20℃或-80℃下長期保存。RNA病毒樣品(如HCV和HIV)可在37℃保存一個(gè)月。
適用范圍 RNA病毒、細(xì)菌、果蠅、植物組織、動(dòng)物組織、培養(yǎng)細(xì)胞、懸浮細(xì)胞 (白細(xì)胞, 流式細(xì)胞儀收集的細(xì)胞)等。
使用優(yōu)點(diǎn) 操作簡單 將組織剪薄浸沒在RNAIN中即可使其RNA不被降解。
替代液氮 使樣品的保存不需液氮,干冰或-80℃冰箱,尤其適用于臨床和野外樣品的快速和大規(guī)模采集。
RNA完整 因RNAIN能迅速抑制組織中RNA酶的活性, 故從中提取的RNA的質(zhì)量跟液氮保存的樣品相比有過之而無不及。
方便運(yùn)輸 處理過的樣品能在25℃保存一周, 使樣品郵寄和運(yùn)輸變得容易和便宜, 有利學(xué)術(shù)合作和交流。
反復(fù)凍融 經(jīng)RNAIN處理的樣品可反復(fù)凍融20次, 其間可對(duì)樣品進(jìn)行各種處理而不影響最終提取的RNA的質(zhì)量。
結(jié)果準(zhǔn)確 RNAIN進(jìn)入細(xì)胞十分快速, 基因表達(dá)在發(fā)生應(yīng)急改變之前就得以鎖定, 故RNA分析更能反映取樣時(shí)的真實(shí)情況。
可比性強(qiáng) RNAIN能減少大規(guī)模樣品處理中的誤差, 增加各次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)間的可比性,對(duì)大規(guī)?;虮磉_(dá)譜的分析尤其有用。
兼容性廣 雖然處理過的樣品最好用RNAOUT提取其RNA, 但也能用TRIzol等
試劑, 樣品還可直接用于組織切片,免疫學(xué)和流式細(xì)胞分析而不影響RNA提取的質(zhì)量。
物理特性 透明液體,室溫(18-25℃)保存, 保存期限為12個(gè)月。 注意事項(xiàng) 不能用于保存冷凍組織和凍融組織。如RNAIN有沉淀,用前需加熱到37℃, 搖晃, 待其溶解后方可使用。
這個(gè)
試劑我們實(shí)驗(yàn)室有人用過,還行,提出的RNA的條帶還挺亮的。最小包裝10ml,99元。
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