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骨髓細(xì)胞學(xué)檢查作為血液科常見檢查手段,其應(yīng)用不僅局限于血液科。通過(guò)形態(tài)學(xué)檢查對(duì)血細(xì)胞形態(tài)、數(shù)目及結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察,從而輔助疾病診療。圖1 骨髓穿刺及骨髓活檢圖(妙佑醫(yī)療國(guó)際)骨髓穿刺和骨髓活檢可用于收集骨髓組織和細(xì)胞。通過(guò)活檢,醫(yī)生可取得患者骨髓的固態(tài)樣本,而骨髓穿刺吸取用以更細(xì)致地觀察骨髓細(xì)胞學(xué)的改變。由于采集的標(biāo)本類型不同,兩種檢查手段可作為互補(bǔ)性檢查,但在不同疾病診療中的重要性有所側(cè)重。一般來(lái)說(shuō),骨髓細(xì)胞學(xué)檢查主要為了解決以下幾個(gè)問(wèn)題:①外周血細(xì)胞成分及形態(tài)異常,如一系、二系或三系細(xì)胞的增多和減少;外周血中出現(xiàn)原始、幼稚細(xì)胞等異常細(xì)胞。②不明原因發(fā)熱,肝、脾、淋巴結(jié)腫大。③骨痛、骨質(zhì)破壞、腎功能異常、黃疸、紫癜、血沉明顯增加等。⑤以及進(jìn)一步骨髓活檢、造血祖細(xì)胞培養(yǎng)、染色體核型分析、微生物及寄生蟲學(xué)檢查(如傷寒、瘧疾)等。劃重點(diǎn),鏡下觀察應(yīng)注意這些!
針對(duì)骨髓細(xì)胞學(xué)的檢查常包括低倍鏡及油鏡檢查,前者主要明確涂片、染色的質(zhì)量,骨髓增生程度,巨核系增生情況及涂片中異常的病理細(xì)胞。而油鏡檢查主要是進(jìn)一步對(duì)骨髓油核細(xì)胞進(jìn)行分類計(jì)數(shù)并更細(xì)致地觀察細(xì)胞形態(tài),明確有無(wú)寄生蟲和其他病理改變。良好的涂片應(yīng)使細(xì)胞恰好分開又不太分離、細(xì)胞染色后紅藍(lán)分明。根據(jù)骨髓中有核細(xì)胞與成熟紅細(xì)胞的大致比例可將骨髓細(xì)胞增生程度分為5級(jí)(表1),一般情況下,骨髓穿刺涂片不用于腫瘤診斷,但不成熟細(xì)胞成堆分布可提示轉(zhuǎn)移瘤,并應(yīng)通過(guò)骨髓活檢和適當(dāng)?shù)拿庖呒?xì)胞化學(xué)染色來(lái)加以確認(rèn)。表1 骨髓細(xì)胞增生程度五級(jí)標(biāo)準(zhǔn)油鏡下計(jì)數(shù)各類有核細(xì)胞500個(gè),根據(jù)髓系(包括粒系和單核細(xì)胞系)細(xì)胞總數(shù)和紅系細(xì)胞總數(shù)算出髓系:紅系的比例,并觀察到各系細(xì)胞形態(tài),包括:①粒系:每一階段細(xì)胞的比值、大小、核形態(tài)及成熟度、胞質(zhì)的顏色及內(nèi)容物(空泡、吞噬物、顆粒、Auer小體)。
②紅細(xì)胞系統(tǒng):各階段細(xì)胞比值,形態(tài)有無(wú)變異(如巨幼樣變、多核、核出芽等),胞質(zhì)量及顏色,是否有點(diǎn)彩、H-J小體等,成熟紅細(xì)胞大小、中心淺染區(qū)大小、形態(tài)變異等。③單核細(xì)胞系統(tǒng):觀察每一階段細(xì)胞的比值、細(xì)胞的大小、細(xì)胞核形態(tài)及成熟度,胞質(zhì)的顏色和內(nèi)容物(空泡、包涵體、Auer小體等)。④淋巴細(xì)胞系統(tǒng):各階段細(xì)胞比值、大小形態(tài)及胞質(zhì)內(nèi)有無(wú)空泡、包涵體等。尤其注意淋巴細(xì)胞胞質(zhì)多少、顏色有何變異。⑤漿細(xì)胞系統(tǒng):占有核細(xì)胞的百分?jǐn)?shù),有無(wú)原漿細(xì)胞、幼漿細(xì)胞,漿細(xì)胞胞質(zhì)有無(wú)其他病理改變。⑥巨核系:分類計(jì)數(shù)25個(gè)巨核細(xì)胞,計(jì)數(shù)各分化成熟階段巨核細(xì)胞數(shù)。注意巨核細(xì)胞大小、形態(tài)、成熟程度、胞質(zhì)中的顆粒及有無(wú)空泡變性,以及血小板多少、形態(tài)、分布。⑦骨髓小粒:判斷細(xì)胞占骨髓小粒的面積和骨髓小粒的細(xì)胞成分(造血細(xì)胞和非造血細(xì)胞比例)。⑧特殊細(xì)胞及分類不明細(xì)胞:注意涂片中有無(wú)細(xì)胞成團(tuán)和巨大病理細(xì)胞(如尼曼-匹克細(xì)胞、轉(zhuǎn)移瘤等)。⑨非造血細(xì)胞:計(jì)數(shù)500個(gè)有核細(xì)胞時(shí),會(huì)觀察到肥大細(xì)胞、網(wǎng)狀細(xì)胞、成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞等非造血細(xì)胞,不應(yīng)計(jì)入有核細(xì)胞計(jì)數(shù),但應(yīng)在骨髓報(bào)告中加以描述。值得注意的是,在骨髓穿刺時(shí)還應(yīng)取外周血涂片、染色,進(jìn)行有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)(200個(gè)細(xì)胞)和細(xì)胞形態(tài)分析,并進(jìn)行網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)。另外,骨髓細(xì)胞化學(xué)檢查可以進(jìn)一步輔助形態(tài)學(xué)檢查的確認(rèn),髓過(guò)氧化物酶(POX)染色、蘇丹黑B染色(SBB)、氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色(NAS-DCE)、α-丁酸萘酚酯酶染色(α-NBE)、酸性非特異性酯酶染色(ANAE)、過(guò)碘酸-堿性復(fù)紅反應(yīng)(PAS),以及酯酶+氟化鈉抑制實(shí)驗(yàn)有助于原粒細(xì)胞、早幼粒細(xì)胞、原單細(xì)胞、幼稚單核細(xì)胞和原幼淋巴細(xì)胞的確認(rèn),同時(shí),中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶(N-ALP)和鐵染色(iron staining)也應(yīng)列為常規(guī)檢查。最終,根據(jù)骨髓檢查結(jié)果可做出以下結(jié)論:(1)肯定性診斷:骨髓呈特異性變化,臨床表現(xiàn)典型者,如各種白血病、巨幼細(xì)胞性貧血、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓轉(zhuǎn)移癌、戈謝病、尼曼-匹克病等。(2)支持性診斷:血象、骨髓象有形態(tài)改變,可解釋臨床表現(xiàn),如缺鐵性貧血、再生障礙性貧血、溶血性貧血等,同時(shí)可建議做相應(yīng)的檢查。(1)大小異常:胞體比同期正常細(xì)胞明顯增大或縮小。巨幼紅細(xì)胞,直徑22~28μm,見于巨幼紅細(xì)胞貧血、紅白血病、急性造血功能停滯。
小型原始紅細(xì)胞,直徑10~12μm,見于缺鐵性貧血及感染等。
巨大型原始粒細(xì)胞,直徑17~22μm,見于急性粒細(xì)胞白血病。
小型原始粒細(xì)胞,直徑8~12μm,與淋巴細(xì)胞相似,見于急性粒細(xì)胞白血病。
(1)數(shù)目的異常:正常時(shí)只有一個(gè)核的細(xì)胞在異常時(shí)變?yōu)槎鄠€(gè)核,見于急性白血病、嚴(yán)重貧血。(2)形態(tài)異常:奇形怪狀,極不規(guī)則,中性粒細(xì)胞胞核分葉困難,出現(xiàn)粗桿狀、花生狀或眼鏡樣的Pelger-Huёt異常等,見于白血病、惡性組織細(xì)胞病。(3)核染色質(zhì)異常:疏松、粗糙。如巨幼紅細(xì)胞或巨幼粒細(xì)胞。(4)核仁異常:大小不一、數(shù)目增多、色澤改變等見于急性白血病、惡性組織細(xì)胞病。(5)異常核分裂:血細(xì)胞核分裂數(shù)目多少不一,形態(tài)不規(guī)則,排列紊亂,常見于白血病、惡性組織細(xì)胞病。(2)內(nèi)容物異常:出現(xiàn)Auer小體、Phi(ф)小體、中毒顆粒、空泡、Dhle體、Chediak-Higashi畸形、Alder-Reilly畸形、May-Hegglin畸形。紅細(xì)胞出現(xiàn)Cabot環(huán)、Howell-Jolly小體、嗜堿性點(diǎn)彩、變性珠蛋白小體。漿細(xì)胞可見Russel小體。(3)著色異常:如成熟的紅細(xì)胞出現(xiàn)嗜多色性紅細(xì)胞、嗜堿性紅細(xì)胞、高色素大紅細(xì)胞、低色素小紅細(xì)胞。常見于溶血性貧血、巨幼紅細(xì)胞性貧血、缺鐵性貧血(4)顆粒異常:顆粒大小異常,增多或減少。如早幼粒細(xì)胞白血病的早幼粒細(xì)胞天青胺藍(lán)顆粒明顯增多,巨幼紅細(xì)胞貧血者有的中、晚幼粒細(xì)胞顆粒減少。(5)內(nèi)外質(zhì)現(xiàn)象:指胞質(zhì)內(nèi)外帶發(fā)育不平衡,在色澤、顆粒大小及分布方面有明顯差別,見于白血病細(xì)胞。紅細(xì)胞減少、血紅蛋白水平降低
網(wǎng)織紅細(xì)胞正常/增多
白細(xì)胞正?;蛟龆?/span>
增生明顯活躍,粒/紅比值減低
紅系顯著增生,巨幼紅細(xì)胞>10%
成熟紅細(xì)胞大小不等
粒系和巨核系可見巨型變
紅細(xì)胞、血紅蛋白水平減低
網(wǎng)織紅細(xì)胞輕度增多
白細(xì)胞和血小板正常或減少
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