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關(guān)于流式做細(xì)胞周期檢測(cè)是否一定用RNase(細(xì)胞周期)

關(guān)于流式做細(xì)胞周期檢測(cè)是否一定用RNase(細(xì)胞周期)


               

細(xì)胞周期
    

   


        


                           


標(biāo)題: 關(guān)于流式做細(xì)胞周期檢測(cè)是否一定用RNase(細(xì)胞周期)

摘要: [關(guān)于流式做細(xì)胞周期檢測(cè)是否一定用RNase(細(xì)胞周期)] 請(qǐng)問(wèn)各位大俠,用流式做細(xì)胞周期檢測(cè),我查閱了不少東東看了,有一個(gè)步驟是加不加RNase的問(wèn)題,很多文獻(xiàn)上都加了,但也有沒加的,這里加RNase是不是主要起去RNA的作用啊,但PI單染并不對(duì)RNA染色啊,不知哪位可以解釋一下,謝謝了! 關(guān)鍵詞:[細(xì)胞周期]……

關(guān)鍵詞: 細(xì)胞周期



                       

                   




             
 




請(qǐng)問(wèn)各位大俠,用流式做細(xì)胞周期檢測(cè),我查閱了不少東東看了,有一個(gè)步驟是加不加RNase的問(wèn)題,很多文獻(xiàn)上都加了,但也有沒加的,這里加RNase是不是主要起去RNA的作用啊,但PI單染并不對(duì)RNA染色啊,不知哪位可以解釋一下,謝謝了!

回復(fù)
ding
回復(fù)
流式細(xì)胞最初的應(yīng)用之一便是檢測(cè)細(xì)胞的DNA含量,它可快速將細(xì)胞循環(huán)中的其它階段與有絲分裂期區(qū)別開來(lái)。這些檢測(cè)是基于對(duì)細(xì)胞內(nèi)DNA以化學(xué)定量方式的染色(染料著色數(shù)量直接與細(xì)胞內(nèi)DNA含量相關(guān))。有相當(dāng)多的對(duì)DNA有高親合力的染料可用于此應(yīng)用。而不同的染料與DNA分子結(jié)合的位點(diǎn)不同。

現(xiàn)用得最多的兩種DNA結(jié)合染料是藍(lán)光激發(fā)的碘化匹啶(PI)(或偶爾也有用EB)和紫外激發(fā)的DAPI和Hoechst染料33342和33258。PI染料是一種插入性的與雙鏈DNA和RNA(當(dāng)要特異地檢測(cè)DNA時(shí),經(jīng)常使用RNAse去除RNA)結(jié)合,而DAPI和Hoechst染料僅與DNA的螺旋結(jié)構(gòu)的亞級(jí)凹槽結(jié)合并與RNA完全沒有任何結(jié)合。Hoechst 33342是現(xiàn)唯一令人滿意的能對(duì)活細(xì)胞DNA時(shí)行染色的染料。其他一些染料在染色前需要破壞細(xì)胞膜,故經(jīng)常使用去污劑或低滲溶液處理或溶劑進(jìn)行固定(酒精)。
所以若是細(xì)胞內(nèi)雙鏈RNA不多的話,可以不加
回復(fù)
謝謝了!






 



             


            相關(guān)熱詞:細(xì)胞周期            




           

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