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在豬體內(nèi)“種”出人源腎臟!中國團(tuán)隊(duì)實(shí)現(xiàn)器官異種再生重要突破
異體器官移植是替代器官功能的有效途徑,但受器官嚴(yán)重短缺的限制。盡管通過胚胎互補(bǔ)在其他大型哺乳動(dòng)物體內(nèi)產(chǎn)生人體器官將是一個(gè)突破性的解決方案,但它面臨許多挑戰(zhàn),特別是人類細(xì)胞與受體組織的整合能力差。

2023年9月7日,中國科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院賴良學(xué)、戴禎、Miguel A. Esteban及潘光錦共同通訊在Cell Stem Cell 在線發(fā)表題為“Generation of a humanized mesonephros in pigs from induced pluripotent stem cells via embryo complementation”的研究論文,該研究發(fā)現(xiàn)通過胚胎互補(bǔ)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞可以在豬體內(nèi)產(chǎn)生人源化中腎。

為了產(chǎn)生具有優(yōu)越生態(tài)位內(nèi)競爭力的人類細(xì)胞,作者將優(yōu)化的多能干細(xì)胞培養(yǎng)條件與誘導(dǎo)過表達(dá)兩種促生存基因(MYCN和BCL2)結(jié)合起來。所得到的細(xì)胞在種間嵌合囊胚的異種環(huán)境中具有顯著提高的生存能力,并在缺乏SIX1和SALL1的腎缺陷豬胚胎中成功形成有組織的人-豬嵌合中期腎(mesonephros)結(jié)構(gòu),直至胚胎第28天。該研究證明了在器官發(fā)生障礙的豬身上產(chǎn)生人源化原始器官的可能性,為再生醫(yī)學(xué)開辟了一條令人興奮的途徑,并為研究人類腎臟發(fā)育打開了一個(gè)人工窗口。


器官移植缺乏具有免疫組織相容性的供體是一個(gè)普遍存在的問題,沒有直接的解決辦法。一種有希望的替代方法是通過胚胎與多能干細(xì)胞(PSCs)的互補(bǔ),產(chǎn)生具有人類組織的大型哺乳動(dòng)物可存活的種間嵌合體,這種嵌合體可以接管通過基因編輯在宿主體內(nèi)產(chǎn)生的特定器官發(fā)生缺陷的生態(tài)位。老鼠和大鼠之間已經(jīng)成功地實(shí)現(xiàn)了胰腺、胸腺、腎臟等器官的種間器官發(fā)生。鑒于豬在生理和器官大小以及胚胎發(fā)育方面與人類相似,豬是培育人體器官的極具吸引力的目標(biāo)。然而,獲得與嚙齒類以外的哺乳動(dòng)物物種的高度嵌合一直是一個(gè)挑戰(zhàn)。雖然已經(jīng)在ETV2或MYF5/MYOD/ MYF6缺失的豬胚胎中產(chǎn)生了人內(nèi)皮和骨骼肌組織斑塊,但由于人PSCs來源的細(xì)胞對(duì)豬組織的總體貢獻(xiàn)較差,迄今為止還沒有產(chǎn)生實(shí)體器官。

種間嵌合率低的主要原因有兩方面:(1)胚泡內(nèi)和組織壁龕內(nèi)與供體細(xì)胞的競爭;(2)供體人PSCs來源細(xì)胞和宿主細(xì)胞之間的發(fā)育狀態(tài)差異,這阻礙了同步發(fā)育進(jìn)程。注射的PSC中促生存途徑的激活可用于通過拮抗細(xì)胞競爭誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡來促進(jìn)嵌合體作用。與單因子過表達(dá)相比,MYCN和BCL2 (N/B)的組合極大地增強(qiáng)了小鼠、兔和豬胚胎的生態(tài)位內(nèi)競爭力。此外,最近開發(fā)了一種新的培養(yǎng)基,允許人類PSCs逐步回退到早期發(fā)育階段,在轉(zhuǎn)化過程中沒有明顯的基因組穩(wěn)定性問題。該培養(yǎng)基(4CL)在胚胎10.5天(E10.5)允許高達(dá)1%的人小鼠嵌合,這與過度表達(dá)抗凋亡因子的引物PSCs的整合效率相當(dāng)。

機(jī)理模式圖(圖源自Cell Stem Cell)

人體腎臟是世界上移植最多的實(shí)體器官之一,也是最早出現(xiàn)在胚胎發(fā)生過程中的器官之一。它經(jīng)歷順序的前腎、中腎和腎間腎規(guī)范。前腎和中腎的形成和消退得到了很好的協(xié)調(diào),隨后輸尿管芽侵入腎間充質(zhì),從而啟動(dòng)腎間充質(zhì)的形成。研究表明,SIX1調(diào)節(jié)中腎小管(mesonephroi)形成和輸尿管芽分支的后腎形成,,而SALL1維持后腎間質(zhì)中腎元祖細(xì)胞和新生腎元。因此,作者假設(shè),對(duì)SIX1/ SALL1缺失的豬胚胎進(jìn)行工程改造,將產(chǎn)生從早期中腎到晚期后腎的腎臟缺陷生態(tài)位,這可能使人類PSCs填補(bǔ)整個(gè)腎臟發(fā)育程序。

Cell Stem Cell 封面

該研究借助具有高分化潛能,強(qiáng)增殖及抗凋亡能力的早期胚胎樣人源多能干細(xì)胞在多基因修飾的器官缺陷豬模型體內(nèi)再生了人源中腎。在世界范圍內(nèi)首次證明了借助胚胎補(bǔ)償技術(shù)實(shí)現(xiàn)實(shí)質(zhì)性功能器官異種體內(nèi)再生的可行性。這一重要突破不僅為人源器官異種體內(nèi)再生奠定了重要的理論及技術(shù)基礎(chǔ),也將為未來解決供體器官短缺這一世界級(jí)難題提供了極大價(jià)值。
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