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流式淋巴細(xì)胞亞群分析的臨床意義
作者: 劉湘源
機(jī)體免疫狀態(tài)是衡量機(jī)體是否患病的重要指標(biāo),目前多采用流式細(xì)胞術(shù)來(lái)監(jiān)測(cè)機(jī)體的免疫狀態(tài),其中最重要的指標(biāo)是檢測(cè)T、B和NK淋巴細(xì)胞的水平。
T細(xì)胞主要包括T輔助細(xì)胞(Th)和T抑制細(xì)胞(Ts)細(xì)胞亞群。CD3+細(xì)胞代表外周血中總的成熟T細(xì)胞,理論上應(yīng)約等于CD4+細(xì)胞和CD8+細(xì)胞的總和,但往往出現(xiàn)CD4+加CD8+細(xì)胞之和大于CD3+,這是因?yàn)镃D4+細(xì)胞包括CD3+/CD4+細(xì)胞(真正Th細(xì)胞)和CD3-CD4+細(xì)胞(非Ts細(xì)胞),而后者包括CD3-CD8+CD16+56+細(xì)胞(一部分NK細(xì)胞)和CD3-CD8+CD16+56-(未知細(xì)胞)。由此可見(jiàn),真正的TH細(xì)胞是CD3+CD4+細(xì)胞,真正Ts細(xì)胞是CD3+CD8+細(xì)胞。尤其當(dāng)患者NK細(xì)胞明顯增加時(shí),會(huì)使CD4細(xì)胞和CD8細(xì)胞的總和遠(yuǎn)大于CD3+細(xì)胞,因此,用三色熒光標(biāo)記才能分析真正的輔助性T細(xì)胞和抑制性T細(xì)胞。
首先在淋巴細(xì)胞中識(shí)別出CD3細(xì)胞,然后在CD3細(xì)胞中再區(qū)分CD4+和CD8+細(xì)胞。NK細(xì)胞的表面無(wú)T細(xì)胞和B細(xì)胞表面標(biāo)志,但有CD16和CD56等標(biāo)志,用CD16+56抗體能鑒定出NK細(xì)胞(一定是CD3陰性),CD3-CD16+56+細(xì)胞才是真正的NK細(xì)胞。根據(jù)是否表達(dá)CD8,又可將NK細(xì)胞分為CD3-CD8+CD16+56+細(xì)胞(所占比例小,不影響CD8比例)和CD3-CD8-CD16+56+細(xì)胞(主要成分)。
B細(xì)胞的表面標(biāo)志是CD19,理論上CD3-CD19+細(xì)胞才是真正的B淋巴細(xì)胞。但CD3+CD19+細(xì)胞很少,可忽略不計(jì),所以CD19+細(xì)胞就是B淋巴細(xì)胞。
在抗腫瘤效應(yīng)中,CD4和CD8分別是T淋巴細(xì)胞的輔助/誘導(dǎo)細(xì)胞亞群與抑制/細(xì)胞毒細(xì)胞亞群,CD4細(xì)胞的主要功能是通過(guò)其分泌的淋巴因子,增強(qiáng)和擴(kuò)大免疫應(yīng)答過(guò)程,輔助誘導(dǎo)其它免疫細(xì)胞如殺傷性T細(xì)胞,B細(xì)胞等共同發(fā)揮抗腫瘤作用,CD4細(xì)胞的減少,導(dǎo)致免疫功能低下。CD4/CD8比值是重要的免疫狀態(tài)監(jiān)測(cè)指標(biāo),其比例的降低與免疫系統(tǒng)損害的程度相關(guān)。
CD4降低見(jiàn)于惡性腫瘤、遺傳性免疫缺陷癥、艾滋病、應(yīng)用免疫抑制劑者;CD8降低見(jiàn)于自身免疫性疾病或變態(tài)反應(yīng)性疾?。籆D4/CD8比值升高見(jiàn)于惡性腫瘤、自身免疫性疾病、變態(tài)反應(yīng)、病毒感染等;CD4/CD8比值降低見(jiàn)于艾滋病(常小于0.5)。監(jiān)測(cè)器官移植排斥反應(yīng)時(shí),CD4/CD8比值升高預(yù)示可能發(fā)生排斥反應(yīng)。                                                                                               
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