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基因工程知識問答(1)

1。常見的目的基因有哪些?

  蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因、植物的抗病基因(抗病毒、抗菌基因),種子貯藏蛋白基因、人胰島素基因、干擾素基因等。

2。哪些新技術(shù)能大大簡化基因工程的操作技術(shù)?

  A、DNA序列自動測序儀,對提取出的DNA進行核苷酸序列分析;

  B、PCR技術(shù),在短時間內(nèi)使目的基因片段成百萬倍地擴增;

  C、從基因文庫中獲得目的基因  將某種生物的總DNA提取出來,用特定的限制酶切割成一個個片段,然后將這些片段隨機與質(zhì)粒或其他的載體連接起來,導入到適宜的宿主細胞中。通過細胞的增殖構(gòu)成各個片段的無性繁殖系(克?。.斶@些克隆多到可以包括某種生物的全部基因時,這一批克隆的總體就稱為該生物的基因文庫。為了有效地保存基因文庫,可通過細菌在固體培養(yǎng)基上繁殖而使包含特定DNA片段的細菌增多。通過分子雜交的方法,可以篩選出含有所需基因的DNA片段的細菌。通過擴增得到大量這樣的細菌,從中分離出所需基因的DNA片段。建立的使用基因文庫是分離高等真核生物工程基因的有效手段。

3。目的基因?qū)胧荏w細胞的方法

  A。直接導入法:電擊、顯微注射、直接吸收、基因槍等。

  電擊法:借助電擊儀高壓脈沖把目的基因打入到宿主細胞中。

  顯微注射法:利用顯微注射儀把目的基因注入到宿主細胞中。

  直接吸收法:把目的基因的宿主細胞混在一起,讓其直接吸收。

  基因槍法:在金屬微粒上涂上目的基因,然后發(fā)射到宿主細胞中。

B。間接導入法常用的載體是質(zhì)粒、λ噬菌體、柯斯質(zhì)粒

   質(zhì)粒是細菌染色體DNA外的小型環(huán)狀雙鏈的DNA分子,它能自我復制,也可整合到細胞染色體中,隨染色體的DNA同步復制。質(zhì)粒通常還含有標記基因,,這可從細胞的表型特征來識別。

   λ噬菌體是侵染細菌的病毒,其環(huán)狀雙鏈的DNA分子可作為基因的載體。

   科斯質(zhì)粒是一種雜種質(zhì)粒,含有質(zhì)粒和λ噬菌體的部分序列,很適合用作真核生物基因工程的載體。

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