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【視頻】植物組織培養(yǎng)概述 | 組織培養(yǎng)

生物庫重要提示:文末有驚喜

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在本視頻中,我們將回顧幾種植物組織培養(yǎng)的方法。


植物組織培養(yǎng)




植物的三種基本能力
植物細(xì)胞全能性(totipotency),指的是植物的每個細(xì)胞都包含著該物種的全部遺傳信息,從而具備發(fā)育成完整植株的遺傳能力。植物細(xì)胞全能性是植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)。
為什么植物細(xì)胞具有全能性呢?我們知道,一個植物體的全部細(xì)胞,都是從受精卵經(jīng)過有絲分裂產(chǎn)生的。受精卵是一個特異性的細(xì)胞,它具有本種植物所特有的全部遺傳信息。因此,植物體內(nèi)的每一個體細(xì)胞也都具有和受精卵完全一樣的DNA序鏈和相同的細(xì)胞質(zhì)環(huán)境。當(dāng)這些細(xì)胞在植物體內(nèi)的時候,由于受到所在器官和組織環(huán)境的束縛,僅僅表現(xiàn)一定的形態(tài)和局部的功能??墒撬鼈兊倪z傳潛力并沒有喪失,全部遺傳信息仍然被保持在DNA的序鏈之中,一旦脫離了原來器官組織的束縛,成為游離狀態(tài),在一定的營養(yǎng)條件和植物激素的誘導(dǎo)下,細(xì)胞的全能性就能表現(xiàn)出來。于是就象一個受精卵那樣,由單個細(xì)胞或離體組織形成愈傷組織然后成為胚狀體,再進(jìn)而長成一棵完整的植株。所以離體培養(yǎng)之所以能夠成功,首先是由于植物細(xì)胞具有全能性的緣故。
已分化的細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)后失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過程叫脫分化(dedifferentiation)。
脫分化與再分化是植物組織培養(yǎng)的重要過程。
已分化的細(xì)胞,當(dāng)受到創(chuàng)傷或進(jìn)行離體培養(yǎng)(也受到創(chuàng)傷)時,已停止分裂的細(xì)胞又重新恢復(fù)分裂,細(xì)胞改變原有的分化狀態(tài),失去原有結(jié)構(gòu)和功能,成為具有未分化特性的細(xì)胞的過程稱脫分化,又稱去分化。
在動物中,脫分化的細(xì)胞具有胚胎間質(zhì)細(xì)胞的功能。
在植物中,一些分化的細(xì)胞經(jīng)過細(xì)胞分裂素的誘導(dǎo),可以脫分化為具有分生能力的薄壁細(xì)胞,進(jìn)而形成植物的愈傷組織(callus)。愈傷組織在一定的培養(yǎng)條件下,又再分化出幼根和芽,形成完整的小植株。整個過程稱為植物組織培養(yǎng)。植物組織培養(yǎng)中脫分化階段需要避光培養(yǎng)。
植物組織培養(yǎng)(plant tissue culture)的理論根據(jù)是植物細(xì)胞的全能性。但是,在一個完整的植株上,各部分的體細(xì)胞只能表現(xiàn)一定的形態(tài),承擔(dān)一定的功能,這是由于受具體器官或組織所在環(huán)境影響的緣故。
植物體的一部分一旦脫離原來所在的器官或組織,成為離體狀態(tài)時,在一定的營養(yǎng)、激素等外界條件下,植物細(xì)胞就會脫分化、再分化,進(jìn)而表現(xiàn)出全能性。在組織培養(yǎng)的過程中,外植體(指從植物體上切下來的離體器官或組織)會進(jìn)行細(xì)胞分裂,形成新的組織。不過,這種新生成的組織沒有發(fā)生分化,細(xì)胞排列疏松且無規(guī)則,高度液泡化,是一團(tuán)無定形的薄壁細(xì)胞,稱為愈傷組織。這種原來已經(jīng)分化,并且具有一定功能的體細(xì)胞(或性細(xì)胞),喪失了原有的結(jié)構(gòu)和功能,又重新恢復(fù)了分裂功能,就叫做植物細(xì)胞的脫分化。[2]  分化細(xì)胞脫分化后細(xì)胞結(jié)構(gòu)有兩點(diǎn)明顯的變化:一是在細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)液泡蛋白;二是葉綠體轉(zhuǎn)變成原質(zhì)體。不同植物種類的材料,脫分化的難易程度不同。一般說來,雙子葉植物比單子葉植物和裸子植物脫分化容易,而與人類生活關(guān)系密切的禾本科植物脫分化則較難。將處于脫分化狀態(tài)的愈傷組織移植到合適的培養(yǎng)基(分化培養(yǎng)基)上繼續(xù)培養(yǎng),愈傷組織就會重新進(jìn)行分化,并形成具有根、莖、葉的完整植株。這個過程就叫植物細(xì)胞的再分化。
已經(jīng)脫分化的愈傷組織在一定條件下,再分化出各種組織器官,或進(jìn)一步形成完整植株,這一過程叫作再分化(redifferentiation)。細(xì)胞再分化過程事實上是基因選擇性表達(dá)與修飾的人工調(diào)控過程。
植物的組織,甚至單個細(xì)胞都具有再生能力(competency)。在植物組織中,尤以分生組織的再生能力更為明顯。
從薄荷、馬鈴薯、蘭花的莖端切下生長點(diǎn),接種在合適的培養(yǎng)基上,均能再生出完整植株。如果用手術(shù)的方法,將莖端分生組織劈切成兩半,或分切成幾塊,則每一部分仍可重建成一個完整的苗端,最后各自發(fā)育成一個枝條。如果把洋紫蘇莖切一楔形缺口,以切斷上下維管束的聯(lián)系,此后在維管束之間的皮層薄壁組織細(xì)胞或髓細(xì)胞會再分化出木質(zhì)部分子和韌皮部分子,使中斷的維管束重新連接起來。
植物再生中,最引人注目的是單個營養(yǎng)細(xì)胞的再生。1955年 F.C.斯圖爾德從胡蘿卜根的韌皮部中分離細(xì)胞,然后培養(yǎng)在液體培養(yǎng)基中,這些細(xì)胞開始伸長和分裂,產(chǎn)生出不規(guī)則的細(xì)胞團(tuán),其中一部分獲得極性,并發(fā)育成類似胚的胚狀體。再將它們由液體培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到固體培養(yǎng)基上,即發(fā)育成幼小的植物體。經(jīng)移栽到花盆內(nèi)生長和發(fā)育一段時間后,還能開花結(jié)實。
施用植物激素或生長調(diào)節(jié)物質(zhì)會加速插枝的生根或離體培養(yǎng)組織的分化。激素的種類、相對和絕對濃度能影響根和芽再生的先后,提示體內(nèi)激素平衡與再生過程關(guān)系密切。
孢子植物中,從單細(xì)胞的藻類到多細(xì)胞的苔蘚植物和蕨類植物,都有再生能力。如傘藻,為一種分化過程相當(dāng)高的單細(xì)胞綠藻,每個藻體的基部具假根,頂端為一圓形的帽狀體,中間由柄相連,細(xì)胞核通常位于假根中。當(dāng)切除帽狀體及一部分藻柄后,又再生出一個新的帽狀體。如果將一部分具核的假根切除,帽狀體仍然可以再生(見細(xì)胞分化)。
各種真菌也有廣泛的再生能力,如香菇等,當(dāng)子實體的某些部分被破壞或分離后,一般仍能重建成正常的子實體。
苔蘚植物中,苔綱的再生能力最為明顯。它們的離體假根、葉片、蒴柄和孢蒴等均能再生出新的原絲體或芽胞,最后發(fā)育成完整植株。

植物組織培養(yǎng)影響因素
  • 培養(yǎng)基
  • 環(huán)境因素
  • 遺傳因素
  • 其他原因

植物培養(yǎng)系統(tǒng)類型

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