為鑒定外來化合物對免疫系統(tǒng)的毒性，必須建立一系列靈敏、特異、簡便、快速的檢測方法，大多數免疫毒理學家認為，要建立一組實驗方法來評價免疫毒性。

一、病理學常規(guī)檢查

病理學檢查對于評價外來化合物對免疫功能的影響十分有用。外來化合物接觸實驗動物后，對免疫系統(tǒng)的毒性作用可表現為淋巴器官重量或組織學的變化、淋巴組織及骨髓的細胞量或質的變化和外周血淋巴細胞數改變。因此為了觀察化學物質對免疫功能的影響，首先可對免疫器官進行大體解剖觀察，如果發(fā)現胸腺重量下降和胸腺發(fā)生萎縮，就應著重檢查細胞免疫功能；有人觀察到動物接觸已烯雌酚、TCDD或環(huán)磷酰胺，胸腺重量與細胞免疫功能狀況呈很好的正相關。

二、淋巴細胞增殖反應試驗

淋巴細胞增殖反應試驗是測定T細胞和B細胞功能活性的簡便方法，重復性也較好。

檢測方法有形態(tài)學方法、同位素摻入法和顏色反應法。顏色反應法測定活細胞及增殖細胞轉化程度簡單、快速，在對一定數量細胞測定時，具有與同位素摻入法同樣的靈敏度，是一種常用的方法。

三、體液免疫功能檢測

有許多方法可用來檢測體液免疫功能，包括抗體滴度、抗體形成細胞（PFC）及B細胞受體試驗等。

抗體形成細胞試驗是一種敏感而且常用的方法。通常用的抗原有綿羊紅細胞（SRBC）、牛血清白蛋白（BSA）、卵白蛋白（0valbumin）、脂多糖（LPS）等。

用瓊脂單向擴散法測定人血清免疫球蛋白的含量，雖不很敏感，但卻是很常用的方法。

四、細胞免疫功能檢測

細胞免疫功能主要由T細胞完成，細胞免疫擔負著遲發(fā)型變態(tài)反應、移植排斥、腫瘤免疫等。

用來測定細胞免疫功能的方法有體內法（遲發(fā)型變態(tài)反應、移植物抗宿主反應、皮膚移植排斥反應）和體外法（淋巴細胞增殖、T細胞毒性及淋巴因子的產生）。

體內檢測遲發(fā)型變態(tài)反應的方法應用較廣，在一般情況下遲發(fā)型變態(tài)反應可以反映機體細胞免疫狀況。原理是當致敏的T細胞再次接觸相應的抗原后，就能引起局部的致敏淋巴細胞釋放出多種淋巴因子，導致以單核細胞浸潤為主的炎癥反應，表現為皮膚紅腫硬結。這種反應一般在抗原注射后24～48小時可以見到。

在人體檢測遲發(fā)型變態(tài)反應可采用皮試法。皮試法中所用的抗原有特異性病原微生物性抗原，如結核菌素（OT）、白喉病毒、腮腺炎病毒等；還有非特異性抗原，如二硝基氯苯、二硝基氟苯及植物血凝素等。結果判定是根據硬結的縱橫直徑平均值，一般在5mm以上為陽性反應。

動物遲發(fā)型變態(tài)反應檢測常用綿羊紅細胞（SRBC）、牛血清白蛋白（BSA）、卵白蛋白（0valbumin）等。在用綿羊紅細胞作為抗原時，一般致敏劑量為l x 108個細胞，致敏注射部位可在背部皮下注射或腹腔注射，經過5天后用l x 108個／20ul的SRBC注射一側足掌，另一側足掌注射生理鹽水。24小時后用精密卡尺測量雙側足墊的厚度，并以雙側足墊厚度的差值來表示。

五、巨噬細胞功能試驗

巨噬細胞在免疫反應中具有很重要的作用，它不僅有非特異性吞噬功能，還參與細胞免疫和體液免疫。巨噬細胞有多種功能，例如吞噬作用、胞內殺傷、抗原攝取和處理、產生干擾素以及對感染細胞或惡變細胞的殺死和溶解作用等。

可通過測定體內對異物的清除率、體內和體外對細菌及細胞的吞噬作用、對腫瘤細胞的生長抑制能力來評價巨噬細胞的功能。

六、宿主抵抗力試驗

機體在接觸化學物質后，可改變其對細菌、病毒、寄生蟲及可移植腫瘤和自發(fā)腫瘤的抵抗力。一般認為，B細胞缺損，機體對細菌敏感性升高；T細胞缺損，則對病毒、寄生蟲、腫瘤敏感性增高。這種試驗是在動物身上進行的整體試驗。

1．腫瘤細胞攻擊試驗本試驗用純系小鼠觀察機體對同系基因的腫瘤細胞的抵抗力。攻擊所用的腫瘤細胞量是使10%～20%正常動物發(fā)生腫瘤的量。觀察指標為腫瘤發(fā)生率、死亡率、發(fā)生腫瘤的平均潛伏期、腫瘤大小、結節(jié)數目以及平均死亡時間等。

2．對傳染源的抵抗試驗在免疫毒性試驗中常用的傳染源有病毒、細菌、寄生蟲。實驗選用傳染源時需考慮以下方面，它對人類或其它動物的危險性；動物是否易感；產生的病變是否有重復性；機體防御機制中是否需要T或B細胞參與；感染過程是否易于觀察。最常用的指標是死亡率。接種劑量應相當于在正常小鼠產生死亡率為10%～20%的劑量。常用的病毒有：腦炎—心肌炎病毒（EMC病毒）、單純皰疹性病毒（HSV）、流感A型病毒（FLU病毒）等。常用的細菌有李斯特菌和綠膿桿菌。常用的寄生蟲有毛線蟲和瘧原蟲。